1. Punjenje medija (faza punjenja medija)
(1) Tokom punjenja medija, pratite da li dolazi do nakupljanja. Ako se primeti nakupljanje, prestanite sa punjenjem i nastavite sledećeg dana nakon daljeg posmatranja.
(2) Prilikom punjenja medija treba usvojiti povremeno prozračivanje. Kontinuirano prozračivanje se može održavati noću, ali treba smanjiti brzinu prozračivanja.
(3) Nakon 24 sata rada, uvesti kontinuirani dotok na 2-3 sata, a zatim nastavite sa prethodno spomenutom aeracijom. Nakon 48 sati rada, promatrajte stvaranje biofilma na mediju. Povećajte brzinu dotoka i produžite trajanje dotoka, dok pratite nivo rastvorenog kiseonika (DO) u rezervoaru, koji bi u idealnom slučaju trebalo da se održava na 1,5–2,0 mg/L. Nakon 72 sata rada, pokrenite kontinuirani dotok i postepeno ga povećavajte do projektovanog nivoa. Pratiti (konvencionalne) indikatore kvaliteta dovodne i otpadne vode. Očekuje se da će projektni zahtjevi za kvalitetom vode biti ispunjeni u roku od približno 7 dana.
2. Faza kultivacije biofilma
Uzgoj biofilma se odnosi na proces podsticanja rasta i akumulacije mikroorganizama u sistemu tretmana kako bi se postigla određena debljina biofilma na podlozi. Glavne metode uključuju statičku kultivaciju i dinamičku kultivaciju.
(1) Statička kultivacija
Statička kultivacija ima za cilj spriječiti da se novoformirani mikroorganizmi ispiru strujom vode, čime se maksimalno povećava vrijeme kontakta između mikroorganizama i sloja medija. Da bi se ubrzalo formiranje biofilma, tokom početne faze, nutrijenti kao što su urea, diamonijum fosfat i 白糖 (šećer) se dodaju jednom dnevno u omjeru C:N:P=100:5:1 kako bi se izbjegao nedostatak nutrijenata u otpadnoj vodi.
Prvo, inokulirani mulj (10% efektivne biohemijske zapremine) i otpadna voda se upumpavaju u biohemijski rezervoar, nakon čega slijedi započinjanje kultivacije aeracijom. Zapremina punjenja medijuma u biohemijskom rezervoaru treba da iznosi 35-40% efektivne zapremine rezervoara. Ostavite sistem da stoji bez prozračivanja 4-5 sati kako biste olakšali vezivanje fiksiranih mikroorganizama na podlogu. Zatim provetrite 1 sat, zatim još 2 sata stajanja, a zatim provetrite 1 sat. Ponovite ovu operaciju. Nakon 4-5 dana, površinu medija treba u potpunosti prekriti biofilmom. Šestog dana započnite kontinuirano-uvođenje influenta niskog protoka.
(2) Dinamička kultivacija
Nakon 6 dana kultivacije sa zatvorenom aeracijom, na površini medija će se formirati tanak sloj žućkasto-smeđeg biofilma. Prebacite se na kontinuirani dotok za dinamičku kultivaciju. Podesite brzinu dotoka i kontrolišite nivo rastvorenog kiseonika (DO) između 2-4 mg/L (mereno pomoću merača rastvorenog kiseonika). Nakon otprilike 15 dana, protozoe kao što su amebe i Litonotus (posmatrane pod biološkim mikroskopom) će se pojaviti na podlozi. Mediji će biti ljepljivi i klizavi na dodir. Nakon 20 dana pojavit će se flagelati, Vorticella, Paramecium i slobodne bakterije. Nakon još 20 dana uzgoja, pojavit će se metazoa kao što su rotiferi i nematode, što ukazuje da se biofilm u potpunosti razvio. Tada može započeti kontinuirani industrijski rad.
3. Faza aklimatizacije biofilma
Svrha aklimatizacije je odabir mikroorganizama prilagođenih stvarnim uslovima kvaliteta vode i eliminacija ne-nekorisnih mikroorganizama. Za procese tretmana s funkcijama uklanjanja dušika i fosfora, aklimatizacija osigurava da bakterije nitrifikacije, denitrifikujuće bakterije i organizmi koji akumuliraju polifosfat-(PAO) postanu dominantne mikrobne zajednice.
Specifičan pristup je održavanje normalnog rada procesa uz strogu kontrolu parametara procesa. Prosječan otopljeni kisik (DO) treba održavati između 2-3 mg/L, a vrijeme aeracije u aerobnom spremniku ne smije biti manje od 5 sati. Tokom ovog procesa treba provoditi svakodnevna mjerenja različitih indikatora kvaliteta vode i kontrolnih parametara. Kada prosječna debljina biofilma dostigne približno 0,2-0,5 mm, kultivacija biofilma se smatra uspješnom. Proces se nastavlja sve dok indikatori efluenta kao što su BOD₅, SS i COD₆ᵣ ne ispune zahtjeve dizajna.